Cautiones pro electrophoresi in gel polyacrylamidico

· polyacrylamidumGel debet esse ex acrylamidis monomero, materia prima polymerisationis, catalysatore, et ius salis et mixturae tamponis simul.

· acrylamidumet BIS (N,N'-methylenum duplex acrylamidum) est monomerum formae matricis geli.

· Ammonii persulfas incipit processum polymerisationis glutinis. Formula glutinis requirit solutionem 10% ammonii persulfas in aqua praeparatam. Pleraque informationes necessitatem usus activi indicaverunt. Attamen, solutio 10% ad 4℃ per aliquot septimanas sine significanti actionis iactura poni potest. Ad 10 ml adde et abice cum glutinum non aggregatur.

Consilium: PercentatioacrylamidumIn glutine sequentiationis et glutine proteinico non idem est. Si solutionem acrylamidi: BIS praeformatam uteris, fac ut lagenam rectam accipias.

· TEMED (N, N, N', N'-tetramethylethylenediamine) est catalysator, in ampulla fusca, in armario frigorifico positus. Addendum paulo antequam glutinum infundatur.

· Vitrum polyacrylamidicum in electrophoresi adhibitum ante et post singulas vices lavandum est. Post electrophoresin, penicillo molli et panno in aqua calida saponata lava, aqua destillata ablue et ad siccandum permitte.

· Humiditas et pulvis cum polymero cavo causare possunt. Ante electrophoresis, laminam vitream purgatore vitri munda et penicillo molli deterge. Aqua destillata lava et charta lintea diligenter sicca. Ablutio cum ethanolo 70% ante detergendum charta adiuvat ad purgandum et siccationem accelerandam. Exempla acrylamidis successive adde: BIS, aquam, solutionem tamponem, ammonii persulfatem, TEMED. Bene agita et statim infunde.

Non necesse est polyacrylamidum ante polymerisationem degasare. (Acrylamidum olim in vacuo ponebatur ad bullas removendas, quia oxygenium polymerisationem inhibet.)

Exempla apicum punctorum glutinis horizontalium.

· Frustum chartae nigrae in arca ima pone, nigro fundo ut foramen aliquod exempli facias et clarius videas.
· liquor glutinis repletus, paulo supra colloidem.
· Si margo lucet, lumina accende, lumen colloidale luceat. Exemplum in pipettam trahe.
· instrumento automatico pipettandi utens.
· In 10-200 mu, punctum unum mobile liquidi in plerisque punctis in exemplo adhiberi potest. Pro foraminibus exempli minimis (minus quam 10μ1), caput pipettae longum ad glutinum sequentiandum adhibitum commodius est.

· pipettatio modo in exemplum immersus, liquorem lente moventem inhalans. Exemplum glycerino viscosum apparere potest, et rapida pompatio bullas aeris in caput pipettae attrahere potest.

· Postquam capita pipettandi exempla inhalantur, caput fluidi leniter in margine tubi movebitur, vel charta tersa caput liquidi extra guttas suget. Cave ne exemplum sugas.

Exemplum in foramen exemplaris pone

· instrumentum pipetendi ad parvam pressionem servandam, exempla paulum movere facit ut caput liquidi redundantis redundant.
· caput pipettationis in tamponem insertum, paulo altius quam foramina punctata, pressionem positivam servat. Apex pipettae in foramen parvum inseri potest.
· Lente et constanter exempla extrahe. Apex pipettae supra foramen speciminis ponitur, et specimen in foramen mergetur. Sine specimine mergere ut foramen speciminis impleat, potius quam introrsum impellere.
· Postquam ultima gutta exempli cum capite liquidi defluxit, liquor ad secundum crus movebitur, lente liquorem attolle et extra buffer exibit.

Quomodo glutinum verticale exemplificandum est?

· Foramina glutinis verticalia inter duo vitrea segmenta formata. In glutine tenuissimo, caput pipettae ne inter duas laminas vitreas inseri quidem potest. Cave glycerinum! Caput pipettae super foramen speciminis pone et specimen in foramen demersum erit.
· Antequam specimen inspicias, fac ut punctum verticale in foramine gel polypropyleni acyl colocetur, priusquam mundus sit. Acrylamidum non polymerizatum et aquam, quae in fundo foraminis appareat, ablue. Aqua foramen significanter angustum reddere potest. Syringa 25ml vel 50ml et acu 18-gauge utere. Liquor electrophoresis infunde et foramen speciminis diligenter ablue.
· Difficile fortasse est foramen exempli videre, sed simul cetera facilia sunt. Si foramina superflua sunt, liquor exempli caeruleo bromophenoli probari potest.